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蜀科離心機(jī)在中藥研究中的應(yīng)用

更新時(shí)間:2017-01-12      點(diǎn)擊次數(shù):3487

摘要:研究丹參酮IIA開放要求、隱丹參酮和丹參酮I組合物(組合物)在斑馬魚體內(nèi)的代謝醒悟,探討斑馬魚用于中藥多組分代謝研究的可行性及合理性。

方法

2.1分組與給藥

取斑馬魚成魚大力發展,平均分成2組約定管轄,每組5條,分別置于30 mL含有1% DMSO純凈水(空白魚組)集成技術、含丹參酮IIA新創新即將到來、隱丹參酮和丹參酮I組合物(丹參酮IIA、隱丹參酮創新的技術、丹參酮I質(zhì)量濃度分別為1.57設計能力、1.02、2.09μg/mL)的1% DMSO純凈水溶液(給藥魚組)棕色瓶中有序推進,同時(shí)設(shè)空白藥物組(組合物1% DMSO純凈水溶液)適應性。

2.2樣品采集與處理

給藥魚組分別于斑馬魚暴露藥液后0、1表示、2不久前、4、6著力增加、8體系、12、18背景下、24 h取藥液4 mL各2份,24 h將魚取出科技實力,用純凈水迅速洗滌3次開展試點,殺掉,去除魚鰭和魚磷可靠保障,稱質(zhì)量規劃,于−70 ℃冰箱放置。各時(shí)間點(diǎn)斑馬魚藥液各2份分別混合共同,于−70 ℃冰箱放置發展。空白藥物組于斑馬魚暴露藥液后0在此基礎上、24 h時(shí)同法取樣推進一步。將不同時(shí)間點(diǎn)取出的斑馬魚藥液冷凍干燥,殘?jiān)?.5 mL甲醇溶解開展,過0.22 μm濾膜帶動擴大,濾液20 μL進(jìn)行HPLC-MS分析。取24 h空白魚組和給藥魚組斑馬魚簡單化,混合實現了超越,剪碎發揮重要帶動作用,稱取1 g,加5 mL生理鹽水勻漿確定性,用蜀科高速冷凍離心機(jī)3 500 r/min離心10 min明確了方向,上清液用等體積醋酸乙酯萃取3次,合并萃取液意料之外,氮?dú)獯蹈杀厝悔厔?,殘?jiān)? mL甲醇溶解制成1 g/mL的溶液,過0.22 μm濾膜相對開放,濾液20 μL進(jìn)行HPLC-MS分析應用優勢。

結(jié)果

組合物經(jīng)斑馬魚作用后,產(chǎn)生丹參酮IIA和隱丹參酮的羥基化和脫氫產(chǎn)物信息化,未發(fā)現(xiàn)丹參酮I的代謝產(chǎn)物發展需要。

結(jié)論

斑馬魚對組合物的代謝與大鼠或鼠肝微粒體的代謝機(jī)制高度一致,提示斑馬魚對該組合物的代謝具合理性全方位,且具有化合物用量少信息、成本低、簡單管理、等優(yōu)點(diǎn)廣泛關註,為斑馬魚用于復(fù)雜的中藥體系代謝研究提供依據(jù)。

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