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蜀科臺(tái)式低速離心機(jī)制備大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞

更新時(shí)間:2017-08-01      點(diǎn)擊次數(shù):4917

  蜀科臺(tái)式低速離心機(jī)操作簡單雙向互動、運(yùn)行平衡重要組成部分、性能穩(wěn)定、安全可靠銘記囑托,廣泛應(yīng)用于事關全面,放射免疫、生物化學(xué)製造業、食品衛(wèi)生發展目標奮鬥、環(huán)保等科研領(lǐng)域自動化裝置。今天來科普一下如何用蜀科臺(tái)式低速離心機(jī)制備大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞,給各位實(shí)驗(yàn)室的朋友參考不斷完善。
 

1.先將受體大腸桿菌接種于LB培養(yǎng)基中活化發揮效力,置于恒溫培養(yǎng)箱中37℃培養(yǎng)過夜。勞動精神。穩定發展。

2.接著取一丁點(diǎn)(槍頭沾一下)上述大腸桿菌培養(yǎng)物菌落接種于3-5毫升LB試管中,于恒溫振蕩器上明顯,37℃振蕩培養(yǎng)過夜(約12-16 小時(shí))更好。

4.再是用移液管無菌條件下,取過夜培養(yǎng)液1 毫升基礎上,接種于新鮮的LB 中(100毫升LB/250毫升三角瓶安全鏈,接種量按菌液濃度而定,一般在1%左右)預下達,于恒溫振蕩器上37℃培養(yǎng)2―3 小時(shí)增持能力。

5.無菌條件下將上述1 毫升菌液倒入1.5毫升EP 管中(離心管應(yīng)帶蓋并高壓滅菌過),每組2支創新為先。

6提高鍛煉、帶菌液的離心管置于冰上10 分鐘,冷卻菌液規模最大,平衡好關註度,置于蜀科臺(tái)式低速離心機(jī)上,3500r/min 離心5 分鐘重要手段。

7穩中求進、無菌條件下,倒去上清LB不折不扣,倒斜離心管再獲,讓LB 流干,留下沉淀菌體成效與經驗,加入預(yù)冷的100mmol/L CaCl2溶液600微升更讓我明白了,用微量取樣器輕輕吸沖底部沉淀菌體,使其懸浮后提供了有力支撐,把2支管轉(zhuǎn)為1支飛躍,搖勻后于冰浴中放置30分鐘。

8積極、重新將CaCl2 菌懸浮液置于蜀科臺(tái)式低速離心機(jī)上大數據,3500r/min離心10分鐘,小心側(cè)倒掉上清CaCl2 ,留沉淀菌體。

9長效機製、再把菌體懸浮在200 微升100mmol/L CaCl2 的溶液中,置于冰上作為轉(zhuǎn)化的受體菌液重要部署。此制備的感受態(tài)細(xì)胞應(yīng)在此步后1小時(shí)24小時(shí)內(nèi)使用等地,效率比較高。

10.在事先制備好的含50μg/ml Amp的LB 平板表面加40ml X-gal 儲(chǔ)液和4μl IPTG儲(chǔ)液,用無菌玻棒將溶液涂勻,置于37℃下放置3-4小時(shí),使培養(yǎng)基表面的液體*被吸收數字技術,備用共享應用。

 

  上面的應(yīng)用對(duì)大家有幫助嗎?操作中的蜀科TD-5Z臺(tái)式低速離心機(jī)榮獲2016“國產(chǎn)好儀器”殊榮尤為突出,是國內(nèi)各大實(shí)驗(yàn)室情況較常見、、生物科技標準、食品環(huán)保等單位*的儀器喜愛。如果您也有需要,趕快吧主要抓手!

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