蜀科低速離心機(jī)操作簡(jiǎn)單空間廣闊、運(yùn)行平衡、性能穩(wěn)定規定、安全可靠,入選“國(guó)產(chǎn)好儀器”措施,在示範推廣,放射免疫、生物化學(xué)、食品衛(wèi)生大大縮短、環(huán)保等科研領(lǐng)域都有廣泛應(yīng)用。今天來介紹一下低速離心機(jī)在提取細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核蛋白中的應(yīng)用促進進步。
提取細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核蛋白的操作步驟如下:
1供給、決定細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)全過程,細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)應(yīng)該是80%或者更好:
2更高要求、用蜀科離心機(jī)以1500r/min離心5min
3、棄上清液優勢領先,用等體積的冷PBS洗細(xì)胞經驗分享,像步驟2那樣,反復(fù)3次
4新技術、根據(jù)估計(jì)的沉淀量加入5倍體積的isotonic lysis buffer到細(xì)胞顆粒中培養,使細(xì)胞溫和懸浮,盡量避免泡沫
5趨勢、加入裂解液lysis buffer在懸浮的細(xì)胞中高效流通,并放在冰上15min讓細(xì)胞膨脹,可以通過顯微鏡檢查
6預下達、對(duì)于細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中膨脹的細(xì)胞增持能力,加入10%的IGEPAL CA-630使后的濃度達(dá)到0、3%創新為先,混勻提高鍛煉,加的時(shí)候要溫和
7統籌推進、立即用蜀科低速離心機(jī)離心(量大的可以用1、5ml的 EP管進行培訓,以5500r/min離心30s科普活動;量大的可以用50ml的管子以5500r/min離心2min)
8、轉(zhuǎn)移上清液(細(xì)胞質(zhì)蛋白)到一個(gè)新的冷凍管中
9關鍵技術、用懸浮顆粒5倍體積的isotonic lysis buffer懸浮細(xì)胞逐漸完善,并混勻。
10有所提升、用離心機(jī)離心細(xì)胞懸浮液保護好,以1500r/min離心5min,移掉上清液
11組織了、用2/3倍體積的extraction buffer懸浮顆粒
12充足、把管子放置在震蕩混勻器上,以700r/min表現,15min震蕩混勻異常狀況,接著以1400r/min,15min,整個(gè)過程要仔細(xì),避免泡沫產(chǎn)生
13的積極性、以9400r/min離心15min更多可能性,低溫離心完后轉(zhuǎn)移上清液到一個(gè)新的冷凍離心管中
14、分成幾份用液氮冷凍高效,并且保存起來(長(zhǎng)期保存應(yīng)放在-80℃上分析,短期保存要放在-20℃上)。
蜀科儀器專注于離心機(jī)的研發(fā)質量、生產(chǎn)、銷售,產(chǎn)品遠(yuǎn)銷海內(nèi)外不久前,低速離心機(jī)各項(xiàng)指標(biāo)更是處于行業(yè)優(yōu)勢(shì)地位緊迫性,還可提供定制服務(wù)。
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